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MES的全稱是2-嗎啉乙磺酸,是一種人工合成的兩性離子緩沖劑。它在1966年由諾曼·古德(Norman Good)團隊開發(fā),屬于著名的“Good's緩沖劑”家族,是生物化學和分子生物學實驗中常用且重要的pH緩沖劑之一。
作為“Good's緩沖劑”家族的一員,MES擁有一系列優(yōu)越特性:
① 理想的pKa值:MES的pKa值在25°C時為6.15。根據(jù)緩沖理論,緩沖液在其pKa值±1的范圍內(nèi)最有效。因此,MES的理想緩沖范圍是pH 5.5 - 6.7。這個范圍恰好覆蓋了許多生物化學反應的關鍵pH。
② 生物相容性好:對酶活性、細胞代謝干擾小;細胞毒性小,常用于細胞培養(yǎng)和蛋白質(zhì)研究。
③ 化學惰性:不參與或干擾大多數(shù)生化反應;不會與必需的二價陽離子(如Mg2?、Ca2?)強烈結(jié)合,而這對于許多酶(如ATP相關酶)的活性至關重要。
④ 高水溶性:在水中溶解度很高,可以方便地配制高濃度儲備液(如1M)。
⑤ 低紫外吸收:在波長大于260nm時吸光度很低,不會干擾核酸或蛋白質(zhì)的紫外分光光度法檢測。
⑥ 熱穩(wěn)定性好:在高溫下相對穩(wěn)定。
鑒于MES優(yōu)越的理化性質(zhì),與其他常用緩沖液成分相比具有以下顯著優(yōu)勢。
MES vs. PBS(磷酸鹽緩沖液) PBS在pH 7.0-7.4范圍緩沖能力強,但會與鈣、鎂離子結(jié)合,并可能抑制某些酶活性。MES則沒有這些問題,且可以在更酸的pH下工作。
MES vs. Tris Tris的pKa為8.07,是堿性pH范圍的經(jīng)典緩沖劑。而MES是酸性至中性范圍的補充。Tris對溫度敏感,且可能在某些反應中作為活性基團參與。
MES vs. HEPES HEPES的pKa為7.55,是細胞培養(yǎng)中常用的中性緩沖劑之一。MES則可以在更酸的pH范圍內(nèi)作為HEPES的補充。
綜合上述優(yōu)勢特點,MES在生命科學研究的各個領域都有廣泛應用:
- 蛋白質(zhì)電泳與純化:SDS-PAGE(蛋白凝膠電泳)/層析色譜。
- 細胞生物學:用于配制培養(yǎng)基或灌流液,維持細胞外環(huán)境的pH穩(wěn)定。
- 細胞器分離:在亞細胞組分分離的勻漿和離心介質(zhì)中提供緩沖環(huán)境。
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生物化學與酶學:為酶活性測定、酶動力學研究提供穩(wěn)定的pH環(huán)境。
- 分子生物學:Northern Blot(RNA印跡)/某些核酸雜交和檢測實驗中作為緩沖成分。
綜上所述,MES是一款性能卓越、應用廣泛的緩沖劑。其核心價值在于能夠提供一個pH值為5.5 - 6.7的弱酸性生理范圍的穩(wěn)定、惰性且廣泛兼容的化學環(huán)境,以確保生命科學實驗的順利開展。
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貨號 |
中文名稱 |
英文名稱 |
CAS |
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A0689 |
2-嗎啉乙磺酸 |
MES anhydrous BioChemica |
4432-31-9 |
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